蛋白透析袋
产品名称:蛋白透析袋
产品编码:
MD10-500D;MD10-1000D;MD10-5000D;MD10-10000D
MD16-500D;MD16-1000D;MD16-5000D;MD16-10000D
MD24-500D;MD24-1000D;MD24-5000D;MD24-10000D
MD31-500D;MD31-1000D;MD31-5000D;MD31-10000D
MD12-10000D
透析是利用半透膜的选择性在溶液里分离大分子和小分子的一种分离技术,常常用于除去蛋白或核酸样品中的盐、变性剂、还原剂之类的小分子杂质,有时也用于置换样品缓冲液。样品在膜的一边,缓冲液在另一边,小分子即向两边扩散直到平衡,而大分子则由于半透膜的阻拦而留在一端,通过不断更换缓冲液,即可将样品中要除掉的小分子稀释到足够低的浓度。
技术参数:
△PH稳定范围 : 5-9
△污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm
△化学兼容性: 与很多盐兼容,比如CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
△温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
△蛋白吸附 :每克透析袋吸附蛋白量小于1ng
透析袋使用前处理方法:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
7.实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮10min即可使用。
透析袋的选择:
(1)正确选择合适的截留分子量
截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为25.
选择截留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少90%
的保留率。
(2)正确选择扁平宽度
透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散
距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15厘米的透析袋
(3)透析袋的化学相容性
化学相容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。温度,浓度,长时间曝光等因素的改变可能
影响产品的使用。建议您自设条件进行测试。
透析袋的使用:
下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。
透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。
1. 把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。
(例如:在一升透析液中透析10毫升的样品)
2. 裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的20%)作为头部空间。
3. 把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋。
4. 由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5. 把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6. 透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许经过一夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。
建议在(透析后)2-4小时,6-8小时和10-14小时(第2天早晨)更换透析液。
在后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。
注:对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。
7. 透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。
纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃,再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。
透析袋应用:
去除盐类,表面活性剂和溶剂
样品溶液的缓冲液置换和PH值的调节
浓缩蛋白质,多肽和抗体
DNA电洗脱
电泳前稀释蛋白的制备
小分子污染物清除
结合研究
组织培养的提取纯化