Agarose LE (低电滲琼酯醣)
产品名称:Agarose LE
【low EEO, gel strength: ≥1000 g/cm2 (1% gel)】
中文別名:琼酯醣(低电滲)
产品CAS :9012-36-6
产品编码:A006L-100g
琼脂糖,分析级,胶强度(1% gel):1000g/cm2
本公司產品优选石花菜原料进行提取,以保证強度和透明澄清度等等,因此颜色或性狀会不同於Biowest品牌的Agarose,並非受潮或質量問題,可放心使用
RNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和步骤:
RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶,不同的RNA条带也能分开,但无法判断其分子量。
只有在完全变性的条件下,RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时,一定要用变性凝胶。
在需快速检测所提总RNA样品完整性时,配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。
实验步骤:
(1)用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶,加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。
(2)在超净工作台上,用移液器吸取总RNA样品4μl于封口膜上。在实验台上再加入5μl 1×TAE电泳缓冲液及1μl 的10X载样缓冲液,混匀后,小心加入点样孔。
(3)打开电源开关,调节电压至100V,使RNA由负极向正极电泳,约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。
RNA的变性琼脂糖凝胶检测:
操作:
(1) 将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用。
(2) 配制琼脂糖凝胶。
①称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml 锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。
②待胶凉至60--70 ℃,依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5ul 溴化乙锭,混合均匀。
③灌制琼脂糖凝胶。
(3) 样品准备:
① 取 DEPC处理过的500ul小离心管,依次加入如下试剂: 10x MOPS缓冲液2ul,甲醛3.5ul,甲酰胺(去离子)10ul,RNA 样品 4.5ul,混匀。
② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟,再置冰上2分钟。
③ 向管中加入3ul 上样染料,混匀。
(4)上样。
(5)电泳:电泳槽内加入1XMOPS缓冲液,于7.5V/ml 的电压下电泳。
(6)电泳结束后,在紫外灯下检查结果。
应用