用作除草剂,特别适于用作棉花脱叶剂,HIS3作为报告基因时,会有一定程度的泄漏表达,出现背景过高的现象,这时可以在筛选培养基中加入适量的HIS3蛋白竞争性抑制剂3-AT(3-amino-1,2,4-triazole),以降低背景;或者增加一个筛选标记Ade来进行更加严格的筛选。加入的3-AT浓度过高,蛋白间比较弱的相互作用也可能被抑制,因此需要确定3-AT的最适浓度。
用于酵母细胞自激活的检测,自激活检测将含有诱饵蛋白的酵母菌,分别图板单缺培养基以及含10-80mM的3-AT的二缺(单缺-His)培养基上。30℃培养。理想情况 10mM浓度的3-AT平板会有少量生长,20mM浓度的3-AT不能或极少生长。如在80mM浓度的3-AT平板上生长的酵母不能用于双杂交筛选。自激活活性太高而不能进行双杂交筛选。
3-氨基-1,2,4-三氮唑,别名杀草强,英文名称Amitrole。非选择性除草剂,适于用作棉花脱叶剂,还可用作照相的试剂以及分散染料、树脂固化剂等。
外观:白色至黄色粉末
分子式:C2H4N4
分子量:84.08
溶解性(in water):50 mg/ml
纯度≥96.0%
HIS3作为报告基因时,会有一定程度的泄漏表达,出现背景过高的现象,这时可以在筛选培养基中加入适量的HIS3蛋白竞争性抑制剂3-AT(3-amino-1,2,4-triazole),以降低背景;或者增加一个筛选标记Ade来进行更加严格的筛选。加入的3-AT浓度过高,蛋白间比较弱的相互作用也可能被抑制,因此需要确定3-AT的最适浓度。
酵母杂交使用建议:
用于酵母细胞自激活的检测,自激活检测将含有诱饵蛋白的酵母菌,分别图板单缺培养基以及含10-80mM的3-AT的二缺(单缺-His)培养基上。30℃培养。
理想情况 10mM浓度的3-AT平板会有少量生长,20mM浓度的3-AT不能或极少生长。如在80mM浓度的3-AT平板上生长的酵母不能用于双杂交筛选。自激活活性太高而不能进行双杂交筛选。