5-氟乳清酸（5-Fluoroorotic Acid，5-FOA）用于酵母反选是一种常用的分子遗传筛选方法。酵母菌质粒清除、质粒穿梭、等位置换和双杂交筛选都会用到5-FOA。5-FOA自身对酵母细胞无毒，但功能型URA3基因能编码表达乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶（OMP脱羧酶），将其转化为有毒形式（如5-氟尿嘧啶），从而使得酵母细胞无法生长。因此，在添加尿嘧啶的5-FOA培养基中，携带URA3突变基因的酵母菌能正常生长。5-FOA主要用于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae（URA3）的鉴定和筛选，虽然曾用于其他菌株，包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe（URA4 and URA5），白色念珠菌Candida albicans（URA3）和大肠杆菌E. coli （pyrF）。酵母双杂交系统中5-FOA的使用允许构建激活结构域杂交文库来鉴定蛋白-蛋白相互作用。
工作浓度: 1-500mg/mL(500mg/mL时会有较高的背景。
外观：类白色至淡黄色粉末
贮存条件：-20℃ 避光保存
保质期：12 个月
分子式：C5H3FN2O4
分子量：174
纯度≥≥98%（HPLC）
熔点：~258°C（高温非常稳定，如煮沸和高压灭菌）
溶解性：溶于DMSO，微溶于水，乙醇，甲醇
产品应用：
1. 检测酵母URA3基因表达；
2. 构建酵母双杂交文库；
3. 其他酵母遗传学领域包括基因替换，可移动遗传因子分析和基因突变鉴定研究。
常见问题：
Q1. 如何保存5-FOA？
A1. 5-FOA粉末可置于4°C 短期保存，-20°C长期保存。根据产品特性溶解配置储存液，需避光置于4°C 短期保存。小量分装后-20°C长期保存，可稳定保存6个月。
Q2. 5-FOA选择性培养基pH是多少？
A2.大于pH 4.5条件下5-FOA选择性被破坏，唯一的问题在于质子化形式的FOA会渗透进入细胞。一般情况标准配方配置的平板pH=2.8。在pH=6或6.2时5-FOA完全无活性，pH =5.4时5-FOA活性很好，pH=4或更低时5-FOA活性达到100%。正常情况配置5-FOA培养基不用调pH。
Q3. 预制的5-FOA选择性平板能保存多久？
A3. 绝大多数实验室保存5-FOA预制平板数月（3-6个月）。有的实验室数据显示能放9个月和＞12个月（4°C存放），圈上封口膜防止干燥。
Q4. 5-FOA使用浓度？
A4. FOA（1mg/ml）在酵母分子遗传学中常用作选择性试剂；在Ura+细胞群体重筛选出Ura-细胞；筛选酿酒酵母菌乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶（OMP脱羧酶）突变株。FOA（0.1mg/ml）用来正筛选尿嘧啶营养缺陷型的硫依赖型嗜热古细菌（Sulfolobus acidocaldarius）。
