中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。
其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中
所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.HEPES有些
昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒.原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制.
实际操作中并非如此简单.溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。
HEPES使用方法有两种：(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,
待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.
(2)亦可配成100x贮存液（lmol/L），使用前取99ml培养液加入lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L（100x）HEPES
贮存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,
分装小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.
在 1960 年代中期，N.E.Good鉴于一般的缓冲液系统并不适合生化实验所使用，
必须用人为设计和人工合成的方法来找到专门用于生命科学研究的特定的缓冲体系
这些缓冲体系们都具有以下特质：
1.pKa 在6~8 之间；
2.在水溶液中有高溶解度；
3.盐效应很小；
4.不易被运送通过细胞膜；
5.不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度；
6.不会与金属离子形成错合物，或错合物不沉淀、不干扰生物活性；
7.化学性质稳定。
Good’s缓冲液的主要优点是不参加和不干扰生 物化学反应过程，对酶化学反应等无抑制作用，
所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。
其缺点是：
①价格昂贵
②对测定蛋白质含量的双缩脲法和Lowry法不适用，因为它们会使空白管的颜色加深。
主要作用是防止培养基pH迅速变动。
在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，
此时可以维持pH7.0左右。
一般在进行克隆化培养时要添加HEPES
对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，
一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。
细胞培养常用10mmol/L。
10mmol/L HEPE缓冲液配制方法如下：准确称取HEPTS 2.383g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存。
