将青霉素G钾盐粉末用灭菌的超纯水配制成常规储备液浓度50mg/ml ，并经过无菌处理，可以直接使用。

青霉素属窄谱的杀菌性抗生素，抗菌作用很强。青霉素对多种革兰阳性菌(包括链球菌、肺炎球菌、敏感的葡萄球菌和杆菌)、部分革兰阴性球菌(包括脑膜炎球菌、淋球菌)、螺旋体和放线菌有强大抗菌活性，对革兰阳性杆菌包括白喉杆菌、炭疽杆菌及革兰阳性厌氧杆菌，如破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等敏感; 但对革兰阴性杆菌作用很弱，对结核杆菌、立克次体、病毒等无效。
青霉素是细菌繁殖期杀菌剂，主要通过干扰细菌细胞壁的合成而产生抗菌作用。它能抑制细菌细胞壁的基础成分黏肽的合成，造成细胞壁缺损，使水分渗入细菌胞浆，导致菌体肿胀、变形，最后裂解而死亡。由于革兰阳性菌的细胞壁黏肽含量较革兰阴性菌高，所以对前者作用较强。人和动物的细胞没有细胞壁，所以青霉素对其几乎无毒性。
主要抗革兰阳性菌、革兰阴性球菌、嗜血杆菌属以及致病螺旋体和多数牛放线菌等，但对分支杆菌、支原体、衣原体、立克次体、奴卡氏菌和其他真菌、原虫无作用。