5×蛋白上样缓冲液（含DTT）产品简介：

 
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。

其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。

SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质

本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；

SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。

DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，

消除了蛋白结构之间的差异。

最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。

溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。

5×蛋白上样缓冲液（含DTT）使用说明：

1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。

   如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。

2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。

3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。

5×蛋白上样缓冲液（含DTT）注意事项：

1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右，

   胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。

   请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

2、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，

   请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，

   在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。

 

 适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。

 

上样缓冲溶液也叫加样缓冲溶液,是在电泳分离过程中进行加样的缓冲溶液。

其作用是使欲分离的样品上色,能够在电泳时形成肉眼可见的指示带,可以方便的辨别电泳的速度和位置,

同时上样缓冲溶液可增加样品密度,以确保样品均匀进入样品孔内,加样方便迅速。

加样缓冲溶液的主要成份有染料、SDS、DTT、甘油和缓冲盐溶液。

常用染料有:溴酚蓝(BPB)、二甲苯菁FF(Xylene Cyanol)、橙黄G(Orange(G))、柠檬黄(Tartrazine)等,

染料主要做样品染色；

上样缓冲溶液用量一般是样品量的1/3-1/4。如果样品浓度太大时,一定经过稀释后再加入上样缓冲溶液。

上样缓冲溶液还分为还原性上样缓冲溶液和非还原性上样缓冲溶液,如被分离样品中含有二硫键,

那必须使用还原性上样缓冲溶液；

如被分离样品中根本不含有二硫键就没有必要使用还原性上样缓冲溶液。

含有DTT或巯基乙酸的称还原性缓冲溶液；

不含有还原剂DTT或巯基乙酸的上样溶液,称为非还原性缓冲溶液。

 

还原性上样缓冲溶液非常不稳定,必须在超低温储存。