用于制备微生物培养基；配制ELISA、western等实验的封闭液

 

脱脂奶粉也是常用的生化试剂之一

 

白色或类白色粉末，室温干燥保存

 

 

关于脱脂奶粉和BSA作为封闭剂的一些问题:

问：western blot中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?

答：脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原?的蛋白去封闭膜，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。

问：请问封闭液和抗体稀释液用BSA?和脱脂奶粉有什么区别呢?

答：所谓封闭是用以减少或消除载体上的非特异性结合蛋白的分子，一般是脱脂奶粉或BSA，

    对WesterBlot来说两者均为常用封闭剂。

    脱脂奶粉的成份远较BSA复杂，如果要做ELISA或者phage display时候，建议用BSA。

    但也没有依据脱脂奶粉不能用，注意的是各种品牌的脱脂奶粉中残留的脂质量不同，脂质会影响实验结果，

    即使是用于WesterBlot也要有所挑选。

问：封闭的时候，为什么一定要用脱脂奶粉?

答：膜上有蛋白缺损点，不用蛋白封蛋白缺损点容易出现非特异染色。也可用BSA封，效果各有差異。

问：western封闭为什么用脱脂牛奶，不用全脂的？

答：全脂含有脂肪，乳脂会与奶粉中的蛋白结合，导致封闭的时候蛋白浓度下降，影响封闭的效果，

    有可能造成封闭不完全，所以都会用脱脂的奶粉来做。

 

蛋白转印到膜以后,转印膜上有蛋白缺损点，不封闭蛋白缺损点容易出现非特异染色。

 

脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。

 

原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。

 

也可採用BSA进行封闭。