CAPS (3-环己胺基丙磺酸)

 

产品名称:CAPS 【Assay: ≥99.0% (TLC)】 

 

中文別名:3-环己胺基丙磺酸


产品CAS :1135-40-6


产品编码:C001-25g

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  • 产品介绍
  • 实验用途

环己胺丙磺酸CAPS是一种常用的生化原料,可以用作助焊剂、干燥剂、涂料中水性异氰酸酯的固化剂,

在生化行业,通常作为生物缓冲剂。

根据其纯度和杂质含量的不同,应用的行业也不相同。

从分子结构上看,CAPS是一种环己烷N-取代的氨基磺酸,分子量221.32,具有两性,是一种非常好的

生物缓冲剂,pH缓冲范围9.7-11.1,通常被用作WB实验蛋白质PVDF转膜或硝酸纤维素NC转膜的缓冲液。

【CAS#】 1135-40-6

【分子量】221.32

【分子式】C9H19NO3S

【存储条件】室温,避光防潮

 

  • Good’s缓冲液
在 1960 年代中期,N.E.Good鉴于一般的缓冲液系统并不适合生化实验所使用,
必须用人为设计和人工合成的方法来找到专门用于生命科学研究的特定的缓冲体系
这些缓冲体系们都具有以下特质:
1.pKa 在6~8 之间;
2.在水溶液中有高溶解度;
3.盐效应很小;
4.不易被运送通过细胞膜;
5.不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度;
6.不会与金属离子形成错合物,或错合物不沉淀、不干扰生物活性;
7.化学性质稳定。
Good’s缓冲液的主要优点是不参加和不干扰生 物化学反应过程,对酶化学反应等无抑制作用,
所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。
其缺点是:
①价格昂贵

      ②对测定蛋白质含量的双缩脲法和Lowry法不适用,因为它们会使空白管的颜色加深。

 

 

Western Blot 蛋白质免疫印记实验,原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物样品进行着色,

通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

 

实验注意事项如下:

1.SDS-PAGE电泳:与核酸杂交方法类似,只不过被检测的是蛋白质,探针是抗体,显色用标记的二抗。

一般来说低分子量蛋白用Tri-Glycerine或者Tris-Tricine缓冲体系,高分子量蛋白则用CAPS缓冲系统更好。

缓冲液中的甘氨酸会影响测序,所以现在测序用的转膜缓冲液是10mM/1CAPS10%甲醇。

CAPS电印记缓冲液中的甲醇浓度范围是0~20%,一般甲醇浓度高的缓冲液对低分子量蛋白质的转移效果好,

而甲醇浓度低甚至不含甲醇的缓冲液则有利于高分子量蛋白的转移。

2.PVDF膜处理时先放入甲醇浸泡几秒钟,再放入CAPS电印记缓冲液,后续操作须防止膜干涸,如果PVDF膜

变干,需要重复前面步骤。电泳凝胶也需要在CAPS缓冲液中浸泡5-10分钟,有些强碱性蛋白可不用此步骤。

3.转印条件通常是50V恒压、100-170mA电流强度,室温下进行电印记转移,凝胶和PVDF膜之间的气泡务必

除尽,分子量较高的蛋白注意延长转移时间。

 

4.PVDF膜染色前需取出用去离子水稍微漂洗,用甲醇浸泡,然后用0.1%考马斯亮蓝染色30-50秒,50%甲醇

脱色,去离子水洗涤并晾干即可。

 



 

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