Agarose LM(低熔点琼酯醣)
产品名称:Agarose LM
【low gelling temperature, Gel Strength: ≥ 200 gm/cm2】
中文別名: 低熔点琼酯醣
产品CAS :9012-36-6
产品编码:A007-10g
低熔点琼脂糖(Low melting point agarose)是经过改良使得成胶温度和熔点更低的琼脂糖,并且通过认证(遗传质量认证)相比于常规琼脂糖,分子筛特性更好,条带清晰度更高。非常适用于分子量大于1000 bp核酸的分离以及电泳后核酸片段的回收(因其约在65.5°C熔化,几乎低于所有核酸分子的熔点)。低熔点琼脂糖凝胶电泳纯化回收的DNA胶条重熔后,可以直接用于制备放射性同位素标记的DNA探针。限制性酶切核酸片段经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后,切胶回收的核酸胶条重熔后也可以非常方便的直接克隆到质粒中。本品也适用于组织培养细胞的克隆和病毒空斑实验。
·极高的分辨率
·好溶解,胶液更清澈,可以配制高至4%凝胶
·EEO ≤ 0.10
·凝胶温度 26℃ -30℃ (1.5% gel)
·融胶温度 ≤65℃ (1.5% gel)
·凝胶强度 ≥200g/cm2(1.0% gel)
凝胶制备方法:
1. 配制适量的电泳及制胶用的缓冲液。根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。
注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2. 根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉
(总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量)。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30 秒钟,戴上防热手 套,移开三角锥瓶,
小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热 1 分钟,
或直至琼脂糖完全溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
注:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊 不清。
加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4. 使溶液冷却至 60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为 0.5ug/ml, 并充分混匀。
注:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。
5. 将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3-5mm 之间。
6. 在室温下使胶凝固(大约 30 分钟-1 小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在 4℃下保存,一般可保存 2-5 天。
•核酸的分析电泳
•制备式电泳
•凝胶酶处理实验
•常规分子生物学技术中 DNA 制备凝胶的制备
•电泳后从琼脂糖凝胶中回收的 DNA 可用于酶促过程(限制性酶切、连接等)
琼脂糖浓度与 DNA 分离范围