氯化硝基四氮唑蓝（NBT）常与5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸（BCIP）联合组成碱性磷酸酶的NBT/BCIP检测系统，

其检测原理即在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP首先被水解去除磷酸基团产生强反应性的中间产物，

然后进一步氧化和二聚合产生一种靛青染料（indigo dye）。

而二聚合反应中产生的两个还原当量（-2H）能够还原NBT形成不溶性的NBT-formazan，呈深紫色或者蓝紫色。

这种检测系统无需额外检测设备，检测结果清晰可见，常用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色，

包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，Western/Northern/Southern Blot等结合有碱性磷酸酯酶的膜上的

显色检测，原位杂交以及免疫组化实验等。

本品溶于水或者甲醇，可直接用去离子水配成10 mg/ml的储存液，于4℃短期或者-20℃长期避光保存。

NBT脱氢酶和其它过氧化酶的底物。

用于测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase）；

也是凝血因子I（fibrinogen）的沉淀试剂。

也是碱性磷酸酶底物之一，在碱性磷酸酶的催化下生成不溶性的蓝色产物。

常用于免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)和蛋白印迹(WB)等实验。

NBT经常和BCIP联合使用检测碱性磷酸酶的活性。

这个反应是NBT将吲哚酚氧化形成靓蓝色的不可溶物，

NBT 也被用于其它反应的氧化还原指示剂，包括脱氢酶，苏氨酸脱氨酶，

葡糖糖-6-磷酸脱氢酶，磷酸果糖激酶。

NBT也被用为血液样品中细菌感染的色度指标。