ONPG是β-半乳糖苷酶的底物，形成邻硝基苯酚。邻硝基苯酚在碱性溶液中为黄色，可以在410-420 nm 波长处测定含量。

在pH 10.2的条件下，摩尔消光系数为 2.13×104。我们已经用该产品作为底物在410nm测定处的吸光率

检测β-半乳糖苷酶的活性。

在 Tris缓冲液 ，pH 7.6, 20℃的条件下，β-半乳糖苷酶 (从大肠杆菌中获得)的 Km 值为 9.5×10-4 M ，

在该底物条件下的最大反应速率为134 µmoles/min/mg 酶.该产品可以在水溶液中配制成3 mg/ml的浓度，

储液也可以在磷酸缓冲液中配制。

当用作β-半乳糖苷酶的底物时，可在100 mM 钠磷酸盐缓冲液，pH 7.3，配制成浓度约为20.5 mg/ml的溶液，

可以轻微加热使其完全溶解。

用于检测β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)活性，是β-半乳糖苷酶的显色底物。

经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物，在410－420nm波长可以检测吸光度。

利用b-galactosidase活性与否可以来决定微生物是否可以发酵乳糖，

而b-galactosidase的活性则可利用o-nitrophynyl, b-D-galactopyranoside(ONPG)来测定，

如果有b-galactosidase存在的微生物则会使无色ONPG水解成黄色的o-nitrophynyl(ONP)，

因此水溶液会变成黄色。