实验步骤:
1) 用适当的限制性内切核酸酶消化载体DNA和目的基因；
2) 按连接步骤连接目的基因和载体，并转化到转化DH5α感受态细胞中；
3) 分别挑取单菌落接种于5 mL LB ( 0.1 g·L-1 氨苄青霉素)中，37℃培养过夜；
4) 以2 %体积比转接于2 ml LB( 0.1 g·L-1 氨苄青霉素)中，37℃继续培养2.5 hr，至细菌对数生长期
加0.1 mmol/L IPTG 2 µl诱导3-4 hr，同时设立不加IPTG诱导作为对照；
5) 取上述菌液1 mL，12000 rpm离心10min，收菌沉淀；
6) 重悬于冰的100 µl PBS中，加入PMSF至终浓度为10 mmol/L。震荡器震荡混匀，加入2×加样缓冲液，
煮沸10 min变性，12,000 rpm离心10 min；
7) 分别取诱导前和诱导后的样品10 µl进行SDS-PAGE电泳分析。
（PS：如果表达载体的原核启动子为PL 启动子，则在30 -32 ℃培养数小时，使培养液的OD600达0.4-0.6，
迅速使温度升至42 ℃ 继续培养3 -5h ；
如果表达载体的原核启动子为tac 等，则37 ℃培养细菌数小时达到对数生长期后
加IPTG 至终浓度为1 mmol / L，继续培养3 -5h）
经过实验会发现，IPTG的浓度并不是越大越好。这是由于IPTG对菌体具有一定的毒性，超过浓度也会杀死细胞；
而且一般来讲，我们希望细胞内表达的可溶性蛋白越多越好，但是很多时侯IPTG浓度太高会形成大量包涵体，而可溶性蛋白的量反而减少。
因此，最合适的IPTG浓度往往不是越大越好，反而浓度较低。
对基因工程菌株进行诱导培养目的在于提高目的蛋白的产量，降低成本。
目的基因的表达量除受菌株自身因素和表达质粒的影响外，还受其他外界条件，如诱导物浓度、诱导温度和诱导时间等的影响。
所以一般情况下，一个未知的蛋白在表达纯化之前，最好要对诱导时间，温度以及IPTG浓度进行研究，以便选择合适的条件，获得最好的实验结果。
