5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,5-FOA)用于酵母反选是一种常用的分子遗传筛选方法。酵母菌质粒清除、质粒穿梭、等位置换和双杂交筛选都会用到5-FOA。5-FOA自身对酵母细胞无毒,但功能型URA3基因能编码表达乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶(OMP脱羧酶),将其转化为有毒形式(如5-氟尿嘧啶),从而使得酵母细胞无法生长。因此,在添加尿嘧啶的5-FOA培养基中,携带URA3突变基因的酵母菌能正常生长。5-FOA主要用于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae(URA3)的鉴定和筛选,虽然曾用于其他菌株,包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe(URA4 and URA5),白色念珠菌Candida albicans(URA3)和大肠杆菌E. coli (pyrF)。酵母双杂交系统中5-FOA的使用允许构建激活结构域杂交文库来鉴定蛋白-蛋白相互作用。
工作浓度: 1-500mg/mL(500mg/mL时会有较高的背景。
外观:类白色至淡黄色粉末
贮存条件:-20℃ 避光保存
保质期:12 个月
分子式:C5H3FN2O4
分子量:174
纯度≥≥98%(HPLC)
熔点:~258°C(高温非常稳定,如煮沸和高压灭菌)
溶解性:溶于DMSO,微溶于水,乙醇,甲醇
产品应用:
1. 检测酵母URA3基因表达;
2. 构建酵母双杂交文库;
3. 其他酵母遗传学领域包括基因替换,可移动遗传因子分析和基因突变鉴定研究。
常见问题:
Q1. 如何保存5-FOA?
A1. 5-FOA粉末可置于4°C 短期保存,-20°C长期保存。根据产品特性溶解配置储存液,需避光置于4°C 短期保存。小量分装后-20°C长期保存,可稳定保存6个月。
Q2. 5-FOA选择性培养基pH是多少?
A2.大于pH 4.5条件下5-FOA选择性被破坏,唯一的问题在于质子化形式的FOA会渗透进入细胞。一般情况标准配方配置的平板pH=2.8。在pH=6或6.2时5-FOA完全无活性,pH =5.4时5-FOA活性很好,pH=4或更低时5-FOA活性达到100%。正常情况配置5-FOA培养基不用调pH。
Q3. 预制的5-FOA选择性平板能保存多久?
A3. 绝大多数实验室保存5-FOA预制平板数月(3-6个月)。有的实验室数据显示能放9个月和>12个月(4°C存放),圈上封口膜防止干燥。
Q4. 5-FOA使用浓度?
A4. FOA(1mg/ml)在酵母分子遗传学中常用作选择性试剂;在Ura+细胞群体重筛选出Ura-细胞;筛选酿酒酵母菌乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶(OMP脱羧酶)突变株。FOA(0.1mg/ml)用来正筛选尿嘧啶营养缺陷型的硫依赖型嗜热古细菌(Sulfolobus acidocaldarius)。
我公司提供一系列常用的科研用途抗生素,现货供应,可提供大包装,满足用户多重需求
1、作用机理:干扰细胞膜合成(Cell Membrane Syntesis)
产品名称 | 货号 | CAS | 作用机理 |
达托霉素(Daptomycin) | 103060-53-3 | 与细胞质膜结合,通过与其相互作用引起构象变化,破坏质膜功能。 | |
硫酸多粘菌素B(Polymyxin B Sulphate) | P019 | 1405-20-5 | 与细菌脂多糖的脂质A部分结合,诱导膜孔形成,干扰质膜通透性。 |
硫酸粘杆菌素 Colistin Sulfate (Polymyxin E) | C018 | 1264-72-8 | 与革兰氏阴性菌质膜的脂质结合,从而破坏细胞膜完整性 |
2、作用机理:干扰细胞壁合成(Cell Wall Syntesis interference)
产品名称 | 货号 | CAS | 作用机理 | 主要应用 |
氨苄青霉素钠,Ampicillin, Sodium Salt | A010 | 69-52-3 | β-内酰胺类抗生素,促使细菌细胞膜内层的转肽酶失活,从而抑制细菌细胞壁合成 | 分子生物学筛选抗生素 |
羧苄青霉素二钠盐,Carbenicillin, Disodium Salt | C002 | 4800-94-6 | β-内酰胺类抗生素,促使细菌细胞膜内层的转肽酶失活,从而抑制细菌细胞壁合成 | 分子生物学筛选抗生素 |
噻孢霉素钠,Cefotaxime Sodium Salt | C003 | 64485-93-4 | 通过与青霉素结合蛋白(PBPs)结合来阻止肽聚糖合成过程中zui后一步转肽的发生,进而抑制细胞壁合成 | 植物培养抑制农杆菌污染 |
头孢西丁钠,Cefoxitin Sodium Salt | 33564-30-6 | 第二代头孢菌素类抗生素,通过抑制细菌细胞壁合成来杀灭细菌。 | ||
Bacitracin杆菌肽 | 1405-87-4 | 多肽抗生素,通过抑制脂质焦磷酸去磷酸化,来抑制细菌细胞壁合成 | ||
青霉素G钠盐,Penicillin G, Sodium Salt | P013 | 69-57-8 | β-内酰胺类抗生素,促使细菌细胞膜内层的转肽酶失活,从而抑制细菌细胞壁合成 | 防止真核细胞培养污染 |
盐酸万古霉素,Vancomycin Hydrochloride | V002 | 1404-93-9 | 糖肽类抗生素,干扰细胞壁合成 |
3、作用机理:干扰或抑制蛋白合成(Protein Syntesis interference or inhibition)
产品名称 | 货号 | CAS | 作用机理 | 主要应用 |
硫酸安普霉素(阿布拉霉素),Apramycin Sulfate | A011 | 65710-07-8 | 氨基糖苷类抗生素,通过阻断转位来抑制蛋白合成 | |
Blasticidin S 杀稻瘟菌素S(灭瘟素) | B005 | 3513-03-9 | 核苷肽类抗生素,主要通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性抑制原核和真核细胞的蛋白质合成。 | 细胞生物学,筛选抗生素 |
Chloramphenicol 氯霉素 | C007 | 56-75-7 | 抑制50S核糖体亚基转肽酶步骤的翻译过程 | |
Doxycycline Hyclate 盐酸强力霉素 | D041 | 24390-14-5 | 与30S核糖体亚基结合,干扰tRNA/mRNA相互作用,zui终抑制蛋白合成。 | Tet-on/Tet-off系统效应物 |
硫酸庆大霉素,Gentamycin Sulfate Salt | G005 | 1405-41-0 | 与30S核糖体亚基结合导致密码子错读,阻断肽酰-tRNA从受体位到供体位的转位,进而抑制细菌蛋白质的合成。 | |
硫酸卡那霉素,Kanamycin Sulfate | K001 | 25389-94-0 | 氨基糖苷类抗生素,与70S核糖体亚基结合来抑制转位和诱发密码错编 | 分子生物学筛选抗生素 |
Erythromycin 红霉素 | E003 | 114-07-8 | 大环内酯类抗生素,结合与50S核糖体亚基,阻断新生多肽链的延伸,从而抑制细菌蛋白质合成。 | |
Roxithromycin 罗红霉素 | R007 | 80214-83-1 | 与细菌核糖体50S亚基结合,抑制多肽转位,进而阻断蛋白质合成。 | |
盐酸四环素,Tetracycline Hydrochloride | T009 | 64-75-5 | 穿透细胞膜上的质子通道,进入细胞后与30S核糖体结合,通过阻止氨基酰-tRNA转移到mRNA-核糖体复合物上的受体部位(A部位),从而抑制蛋白质的合成 | 分子生物学筛选抗生素 |
Neomycin Sulfate 硫酸新霉素 | N005 | 1405-10-3 | 与引起错编的 30S 和 50S(有时为 50S)亚基结合;抑制蛋白质合成的开始和延长。 | 细胞生物学筛选抗生素 |
嘌呤霉素盐酸盐,Puromycin Dihydrochloride | P012 | 58-58-2 | 氨基糖苷类抗生素,作为氨酰-tRNA分子3’末端的结构类似物,能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸肽链中,导致肽链合成的*终止,进而阻止蛋白质合成。 | 细胞生物学筛选抗生素 |
盐酸壮观霉素,Spectinomycin Dihydrochloride | S005 | 22189-32-8 | 与细菌核糖体30S亚基结合,干扰肽酰tRNA转位从而抑制蛋白质合成(延伸) | 植物细胞研究筛选抗生素 |
硫酸链霉素,Streptomycin Sulfate | S007 | 3810-74-0 | 氨基糖苷类抗生素,与30S核糖体亚基上的S12蛋白结合,导致mRNA序列错读和转位抑制,进而抑制细菌蛋白质合成。 | 防止真核细胞培养污染 |
Thiostrepton 硫链丝菌素 | 1393-48-2 | 多肽抗生素,防止延伸因子G和 GTP结合到50S核糖体亚基 |
4、作用机理:结合麦角甾醇或抑制生物合成的抗真菌剂(Antifungals that binds ergosterol or inhibit biosynthesis)
产品名称 | 货号 | CAS | 作用机理 | 主要应用 |
两性霉素B,Amphotericin B | A009 | 1397-89-3 | 多烯类抗真菌抗生素,结合真菌细胞膜上的固醇、主要为麦角甾醇。在膜上形成孔道,导致小分子泄露。 | 抗真菌剂,防止真核细胞培养污染 |
Fluconazole 氟康唑 | 86386-73-4 | 干扰真菌麦角甾醇合成和下调金属硫蛋白基因。 | ||
Nystatin 制霉菌素 | 1400-61-9 | 通过与甾醇结合提高敏感真菌的细胞膜通透性。 |
5、作用机理:干扰DNA、RNA或蛋白合成(Interferes with DNA, RNA, or Protein Synthesis)
产品名称 | 货号 | CAS | 作用机理 | 主要应用 |
Cordycepin 虫草素 | 73-03-0 | 转化为虫草素5’-三磷酸,通过poly(A)聚合酶插入核酸,由于缺乏3’-OH导致链合成终止。 | ||
盐酸环丙沙星,Ciprofloxacin Hydrochloride | 86393-32-0 | 氟喹诺酮抗菌素,靶向DNA促旋酶和拓扑异构酶来抑制DNA解链。 | 防止支原体污染 | |
Enrofloxacin 恩诺沙星 | 93106-60-6 | 喹诺酮羧酸衍生物,抑制DNA促旋酶活性。 | ||
Hygromycin B 潮霉素B | H004 | 31282-04-9 | 阻断多肽合成和抑制延伸。 | 细胞生物学,筛选抗生素 |
Nalidixic Acid 萘啶酸 | 389-08-2 | 喹诺酮类抗生素,抑制或调节细菌DNA促旋酶依赖的过程比如DNA聚合,ATP依赖的DNA超螺旋和染色体片段化。 | ||
新生霉素钠盐,Novobiocin Sodium Salt | N008 | 1476-53-5 | 氨基香豆素类抗生素,通过竞争性抑制原核DNA促旋酶和真核DNA拓扑异构酶活性来阻断DNA合成,zui终导致细胞死亡。 | |
腐草霉素,Phleomycin | 11006-33-0 | 阻断细胞进入S周期 | 细胞生物学,筛选抗生素 | |
硫酸巴龙霉素,Paromomycin Sulfate | 1263-89-4 | 通过与16S rRNA结合,抑制蛋白合成中的起始和延伸步骤 | 植物转化筛选抗生素 | |
Rifampicin 利福平 | R004 | 13292-46-1 | 靶向结合DNA依赖性的RNA聚合酶β-亚基,从而抑制RNA合成的开始 | 植物转化筛选抗生素 |
6、其他抗真菌化合物(Additional Antifungal Compounds)
产品名称 | 货号 | CAS | 作用机理 | 主要应用 |
Anisomycin 茴香霉素 | 22862-76-6 | 通过抑制真核核糖体的多肽转移酶活性来抑制蛋白合成。 | ||
巴佛洛霉素A1,Bafilomycin A1 | 88899-55-2 | 动物细胞、植物细胞和微生物V-ATPase特异抑制剂 | ||
硫酸诺尔斯菌素,Nourseothricin (NTC) Sulfate | 96736-11-7 | 抗真菌剂,有效抑制白色念珠菌 | 酵母菌筛选抗生素 | |
Oligomycin 寡霉素 | O002 | 1404-19-9 | 大环内酯抗生素,抑制线粒体ATPase和磷酰基转移。 | |
Tunicamycin 衣霉素 | T019 | 11089-65-9 |