liquid Acrylamide 30% 29:1(液体丙烯酰胺29:1)
产品名称:Liquid Acrylamide 30%
(29:1/Acrylamide:Bis)
中文別名: 液体丙烯酰胺29:1
产品编码:L00529-500ml
聚丙烯酰胺是一种常用的电泳基质,由丙烯酰胺与低聚物交联剂(甲叉双丙烯酰胺,bis)的自由基聚合而成。
聚合后的聚丙烯酰胺凝胶形成网状结构,具有浓缩 效应、电荷效应、分子筛效应。
可用来分离不同分子量蛋白质或寡核苷酸。
可靠的电泳结果取决于聚合反应的可重复性,高纯度的起始试剂是影响凝胶质量的一个重 要因素。
我公司產品99.9% 超纯丙烯酰胺经过严格的纯化和测试,确保了凝胶聚合均一所需的一切品质。
丙烯酰胺有3种形式,可满足每个实验室的需要;
保存条件:
常用:4℃避光保存
非常用:冷凍保存
凝胶浓度(T)/% | 分子量范围/kDa | 凝胶浓度(T)/% | 分子量范围/kDa |
5 10 15 20 |
25-200 10-70 <50 <40 |
5 10 15 20 |
60-170 20-100 10-50 5-40 |
用于SDS-PAGE电泳。
我们除了有配置常规蛋白胶的30%(29:1)制胶液外
还有跑小分子蛋白的40%(37.5:1)制胶液
跑核酸电泳的40%(19:1)制胶液
常见问题及分析
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?
在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
所以,pH对整个反应体系的影响是重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素。
2. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用?
聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关;
制胶缓冲液:浓缩胶选择pH6.7,分离胶选择pH8.9,选择tris-HCL系统,TEMED与APS:APS提供自由基,TEMED是催化剂,催化自由基引起的聚合反应进行;十二烷基磺酸钠(SDS):阴离子去污剂,作用有四:去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。