一、實驗介绍
gRNA識別並結合在目標基因區域引導Cas9蛋白隊結合位點進行切割,引起DNA雙鏈斷裂(DSB),觸發細胞自身的非同源末端修復機制(NHEJ),NHEJ修復的過程中往往會產生DNA的插入或刪除(Indel),造成移碼突變,致使基因功能喪失,從而實現基因敲除
二、实验週期
45-60 工作日
三、交付標準
篩選獲得的單克隆細胞二份、測序結果
四、客戶提供
序列/菌株及信息;敲除基因的名稱或敲除序列
五、實驗流程
細胞鑑定 gRNA設計 CRISPR/Cas9載體構建 gRNA靶點活性檢測
基因敲除細胞系構建 基因型鑑定