5000bp为加亮带，浓度为其他条带的2.5倍；5ul 产品中，每条带含量约 40ng，加亮带约 100ng。

使用含有 EB 的琼脂糖凝胶进行电泳检测时， 将溴酚蓝的条带电泳到约 2/3 的距离时即可，否则小片段部分由于 EB 脱离 DNA，会导致条带变暗。

随附 5xLoading buffer 可用于检测样品时使用。

如何选择合适的Marker?

电泳时的Marker需要根据你电泳条带的大小来选择。比如你是100bp左右，则应选择含有这个条带的Marker，

如10-200的Marker（举例）。当然Marker的条带越多，可以更准确的判断你电泳条带的大小。

100bp DNA Ladder可能是最小的为100bp，但不同公司的可能具体条带不一样，可以先參考说明书，

確認范围中是有包含的条带大小。

主要考慮到marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.

同時如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比较合适.

如果分子量很大,例如在几 K ,就可能要选择lamda HindIII这样最大到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.

DNA Marker 是分子量不同的段，主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时，加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。

通过其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小。

现在常用的DNA MARKER有两种，一种是病毒等DNA经过酶切获得的，分子量大小有零有整，另外一种是固定数值的，比如100bp，

200bp等。

如果你手头有任何一个载体，而且它的序列完全清楚，那么可以采用PCR的方法获得一系列大小不同的片段，

比如上游引物可以使用一个，然后用数数的方法确定下游100bp处的下游引物，扩增出的就是100bp的片段，200bp处的引物就是

200bp的片段，依此类推，可以获得一系列不同大小的片段，扩增后，把它们放到一起，就能获得自制的Marker。