DNA Ladder Marker 100bp-V
产品名称:DNA Ladder Marker 100bp-V
【100、200、300、400、500、600、700、800、900bp、
1Kb、1.2Kb、1.5Kb、2Kb、3Kb、5Kb】
产品编码:
D022-500μL
D022-5000μL(500μL*10)
D022-25000μL(500μL*50)
500bp 和 1200bp 为加亮带,浓度为其他条带的 2.5 倍;5ul 产品中,每条带含量约 50ng,加亮带约 125ng。
使用含有 EB 的琼脂糖凝胶进行电泳检测时, 将溴酚蓝的条带电泳到约 2/3 的距离时即可,否则小片段部分由于 EB 脱离 DNA,会导致条带变暗。
随附 5x Loading buffer 可用于检测样品时使用。
如何选择合适的Marker?
电泳时的Marker需要根据你电泳条带的大小来选择。比如你是100bp左右,则应选择含有这个条带的Marker,
如10-200的Marker(举例)。当然Marker的条带越多,可以更准确的判断你电泳条带的大小。
100bp DNA Ladder可能是最小的为100bp,但不同公司的可能具体条带不一样,可以先參考说明书,
確認范围中是有包含的条带大小。
主要考慮到marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.
同時如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比较合适.
如果分子量很大,例如在几 K ,就可能要选择lamda HindIII这样最大到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.
DNA Marker 是分子量不同的段,主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时,加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。
通过其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小。
现在常用的DNA MARKER有两种,一种是病毒等DNA经过酶切获得的,分子量大小有零有整,另外一种是固定数值的,比如100bp,
200bp等。
如果你手头有任何一个载体,而且它的序列完全清楚,那么可以采用PCR的方法获得一系列大小不同的片段,
比如上游引物可以使用一个,然后用数数的方法确定下游100bp处的下游引物,扩增出的就是100bp的片段,200bp处的引物就是
200bp的片段,依此类推,可以获得一系列不同大小的片段,扩增后,把它们放到一起,就能获得自制的Marker。