将G-418粉末用灭菌的超纯水配制成常规储备液浓度50mg/ml ,并经过无菌处理,可以直接使用。
工作液浓度: 5ug/mL (细菌和藻类),400ug/mL 用于筛选哺乳动物细胞,200ug/mL 用于稳定哺乳细胞。
G418用于选择稳定转化的细胞,它包含承受转座子Tn5和Tn601的新霉素抗性基因。
G418能够干扰核糖体功能而阻断蛋白质的合成。通常不作为抗生素使用,而是在原核和真核细胞筛选或稳定新霉素抗性基因。
抗性来源于细菌的可以在真核细胞中表达的显性基因之一。
抗性基因APH(3')II或氨基糖苷磷酸转移酶3'(II)和氨基糖苷磷酸转移酶3'(I)或APH(3')I
G418是一种氨基糖苷类抗生素 ,在分子遗传试验中,是稳定转染最常用的抗性筛选试剂。
它通过抑制转座子Tn601,Tn5 的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素
包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。
G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。