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30%(W/V)Acrylamide(聚丙烯酰胺)
组分浓度 30%(W/V)Acrylamide
配制量 1 L
 配制方法
  (1)称量下列试剂,置于l L烧杯中。Acrylamide 290 g;BIS 10 g
  (2)向烧杯中加入约600 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
  (3)加去离子水将溶液定容至l L,用0.45 μm滤膜滤去杂质。
  (4)于棕色瓶中4℃保存。
注意:丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。

40%(W/V)Acrylamide
组分浓度 40%(W/V)Acrylamide
配制量 1 L
配制方法:
 (1)称量下列试剂,置于l L烧杯中。Acrylamide 380 g;BIS 20 g。
 (2)向烧杯中加入约600 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
 (3)加去离子水将溶液定容至l L,用0.45 μm滤膜滤去杂质。
 (4)于棕色瓶中4℃保存。
注意:丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。

10%(W/V) AP (过硫酸铵)
组分浓度10%(W/V)过硫酸铵
配制量10 ml
配制方法:
(1)称取1 g AP。
(2)加入10 ml的去离子水后搅拌溶解。
(3)贮存于4℃。
注意:1 0%过硫酸铵溶液在4℃保存时可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。

5×Tris-Glyclne Buffer (SDS-PAGE电泳缓冲液)
组份浓度: 0.125 M Tris,1.25 M Glyclne(甘氨酸),0.5%(W/V)SDS
配制量 1 L
配制方法:
(1)称量下列试剂,置于l L烧杯中。Tris 15.1 g;Glyclne 94 g;SDS 5.0 g
(2)加入约800 ml的去离子水,搅拌溶解。
(3)加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存。

5×SDS-PAGE Loading Buffer
组份浓度:250 mM Tris-HCl(pH6.8);10%(W/V) SDS;0.5%(W/V) BPB;50%(V/V) 甘油;5%(W/V) 2-ME
配制量: 5 ml
配制方法:
  (1)量取下列试剂,置于10 ml塑料离心管中。
        1 M Tris-HCl(pH6.8) 1.25 ml;SDS 0.5 g;BPB 25 mg;甘油 2.5 ml
  (2)加去离子水溶解后定容至5 ml。
  (3)小份(500 μl/份)分装后,于室温保存。
  (4)使用前将25 μl的2-ME加到每小份中。
  (5)加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右。

考马斯亮蓝R-250染色液
组份浓度: 0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇,10%(V/V)冰醋酸
配制量 :1 L
配制方法:
 (1)称取1 g考马斯亮蓝R-250,置于1 L烧杯中。
 (2)量取250 ml的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。
 (3)加入100 ml的冰醋酸,搅拌均匀。
 (4)加入650 ml的去离子水,搅拌均匀。
 (5)用滤纸除去颗粒物质后,室温保存。

考马斯亮蓝染色脱色液
组份浓度:10%(V/V) Ethanoic acid,5%(V/V)乙醇
配制量:1 L
配制方法
(1)量取下列溶液,置于l L烧杯中。Ethanoic acid 100 ml;乙醇50 ml;dH2O 850 ml
(2)充分混合后使用。

凝胶固定液(SDS-PAGE银氨染色用)
组份浓度:50%(V/V)甲醇,10%(V/V) Ethanoic acid
配制量:100 ml
配制方法:
(1)量取下列试剂,加入100~200 ml的试剂瓶中。甲醇 500 ml;Ethanoic acid 100 ml;dH2O 400 ml。
(2)均匀混合后室温保存。

凝胶处理液(SDS-PAGE银氨染色用)
组份浓度:50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛
配制量:100ml
配制方法:
(1)量取下列试剂,加入100-200ml的试剂瓶中。
甲醇 50ml;  戊二醛 10ml;  dH2O 40ml
(2)均匀混合后室温保存。

凝胶染色液(SDS-PAGE银氨染色用)
组分浓度:0.4%(W/V)AgNO3,1%(V/V)浓NH3.H2O,0.04%(W/V)NaOH
配制量:100ml
配制方法:
(1)量取下列试剂,加入100-200ml的试剂瓶中。
     20% AgNO3 2ml;;浓NH3.H2O 1ml;4% NaOH 1ml;dH2O 96ml
(2)均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状,此时应补加浓氨水,直至透明。
(3)本染液应现用现配,不宜保存。

显影液(SDS-PAGE银氨染色用)
组份浓度:0.005%(W/V)柠檬酸,0.02%(V/V)甲醛
配制量:1L
配制方法:
(1)称量下列试剂,置于1L试剂瓶中。柠檬酸 50mg;甲醛 0.2ml。
(2)加入1L去离子水后,摇动混合溶解。
(3)室温保存。

 

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