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Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)
组份浓度 100 mg/ml Ampicillin
配制量  50 ml
配制方法
1.  称量 5 g Ampicillin 置于 50 ml 离心管中。
2.加入 40 ml 灭菌水,充分混合溶解后,定容至 50 ml。
3. 用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。

IPTG(异丙基-β -D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)
组份浓度 24 mg/mL IPTG
配制量 50 mL
配制方法
1.称 1.2 g IPTG 置于 50 ml 离心管中。
2.加入 40 ml 灭菌水,充分混合溶解后,定容至 50 ml。
3.用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1 ml,份)后,-20℃保存。 

X-Gal (20 mg/ml)
组份浓度  20 mg/ml X-Gal
配制量 50 ml
配制方法
1. 称量 l g X-Gal 置于 50 ml 离心管中。
2.加入 40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至 50 ml。
3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存。

LB 培养基
组份浓度 1%(W/V)Tryptone( 胰 蛋 白 胨 ) , 0.5%(W/V)Yeast Extract( 酵 母 提 取 物 ) ,1%(W/V)NaCl
配制量 1L
配制方法
1. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。 Tryptone 10 g;Yeast Extract 5g;NaCl   10 g
2. 加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加 5 N NaOH(约 0.2 m1),调节 pH 值至 7.0。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L。
5.高温高压灭菌后,4℃ 保存。

LB/Amp 培养基
组份浓度 1%(W/V)  Tryptone;0.5%(W/V)  Yeast Extract;1%(W/V) NaCl;0.1 mg/ml Ampicillin
配制量  1L
配制方法
1. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。Tryptone 10 g;Yeast Extract 5g;NaCl  10 g
2.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加 5 N NaOH(约 0.2 mL)。调节 pH 值至 7.0。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L。
5.高温高压灭菌后,冷却至室温。
6.加入 1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合。
7.4℃保存。

TB 培养基
组份浓度 1.2%(W/V) Tryptone;2.4%(W/V)Yeast Extract; 0.4%(V/V) Glycerol; 17mM KH2PO4;72mM  K2HPO4
配制量 1L
配制方法
1.配制磷酸盐缓;中液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解 2.31 g KH2PO4 和 l2.54 g K2HPO4 于 90 ml 的去离子水中, 搅拌溶解后, 加去离子水定容至 100 ml,高温高压灭菌。
2. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。 Tryptone 12 g;Yeast Extract 24 g ; Glycerol  4ml
3.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L 后,高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至 60℃以下时,加入 100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.4℃保存。

TB/Amp 培养基
组份浓度 1.2%(W/V)  Tryptone ;2.4%(W/V) Yeast Extract;0.4%(V/V)Glycerol ; 17 mM KH2PO4;72 mM K2HPO4;0.1 mg/ml Ampicillin
配制量 1L  
配制方法
1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解 2.31 g KH2PO4,和 12.54g K2HPO4 于 90 ml 的去离子水中, 搅拌溶解后, 加去 离子水定容至 100 ml,高温高压灭菌。
2. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。 Tryptone 12 g;Yeast Extract 24 g;Glycerol  4 ml
3.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
4.加去离子水将培养基定容至 l L 后,高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至 60℃以下时, 加入 100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液和1ml的Ampicillin( 100mg/ml )。
6.均匀混合后 4℃保存。

SOB 培养基
组份浓度 2%(W/V) Tryptone;0.5%(W/V)Yeast Extract; 0.05%(W/V)NaCl ; 2.5mM KCl ;10 mM MgCl2
配制量  1L   
配制方法
1. 配制 250 mM KCl 溶液。
在 90 ml 的去离子水中溶解 l.86 g KCl 后,定容至 100 ml。
2. 配制 2 M MgCl2 溶液。
在 90 ml 去离子水中溶解 19 g MgCl2 后,定容至 100 ml,高温高压灭菌。
3. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。
Tryptone 20 g;Yeast Extract 5g;NaCl   0.5 g
4.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
5.量取 10 m1 250 mM KCl 溶液,加入到烧杯中。 滴
6.加 5 N NaOH 溶液(约 0.2 m1),调节 pH 值至 7.0。
7.加入去离子水将培养基定容至 l L。
8.高温高压灭菌后,4℃保存。
9.使用前加入 5 ml 灭菌的 2 M MgCl2 溶液。

SOC 培养基
组份浓度 2%(W/V) Tryptone;0.5%(W/V)Yeast Extract; 0.05%(W/V)NaCl ; 2.5mM KCl ;10 mM MgCl2;20 mM  Glucose(葡萄糖)
配制量 1L
配制方法
1. 配制 l M Glucose 溶液。
将 18 g Glucose 溶于 90 ml 去离子水中, 充分溶解后定容至 100 ml。 用 0.22 滤膜过滤除菌。
2.向 l 00 ml SOB 培养基中加入除菌的 1 M Glucose 溶液 2 ml,均匀混合。
3.4℃保存。

2× YT 培养基
组份浓度 1.6%(WV)Tryptone,1%(W/V)Yeast Extract,0.5%(W/V)NaCl
配制量 1L
配制方法
1. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。
Tryptone 16 g;Yeast Extract  10 g;NaCl  5g
2.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加 5 N NaOH,调节 pH 值至 7.0。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L。
5.高温高压灭菌后,4℃保存。

Фb×broth
组份浓度  2%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,o 5%(W/V)MgSO4· 7H2O
配制量  l L
配制方法
1. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。 Tryptone 20 g;Yeast Extract 5g;MgSO4· 7H2O 5g
2.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加 1 N KOH。调节 pH 值至 7.5。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L。
5.高温高压灭菌后,4℃保存。

NZCYM 培养基
组份浓度 0.5%(WV) Yeast Extract;0.1%(WV) Casamino Acid; 1%(WV) NZ 胺;0.5%(WV)  NaCl;0.2%(WV) MgSO4· 7H2O
配制量 1L
配制方法
1. 称取下列试剂。置于 l L 烧杯中。  Yeast Extract 5g; Casamino Acid(酪蛋白氨基酸)1g;NZ 胺 10 g;NaCl  5g; MgSO4· 7HO  2g
2.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加 5 N NaOH(约 0.2 m1),调节 pH 值至 7.0。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L。
5.高温高压灭菌后,4℃保存。

NZYM 培养基
组份浓度 0.5%(WV)Yeast Extract ;1%(WV) NZ 胺;0.1%(WV) NaCl ;0.2%(WV)  MgSO4· 7H2O
配制方法 NZYM 培养基除不含 Casamino Acid 外,其他成份与 NZCYM 培养基相同。

NZM 培养基
组份浓度 1%(WV) NZ 胺 ;0.1%(WV) NaCl ;0.2%(WV) MgSO4· 7H2O
配制方法:NZM 培养基除不含 Yeast Extract(酵母提取物)外,其他成份与 NZYM 培养基相 同。

一般固体培养基的配制
配制方法
1. 按照液体培养基配方准备好液体培养基,在高温高压灭菌前,加入下列 试剂中的一种。
 Agar(琼脂;铺制平板用) 15 g/L;Agar(琼脂;配制顶层琼脂用) 7 g/L;Agarose(琼脂糖;铺制平板用)15 g/L ;Agarose(琼脂糖;配制顶层琼脂用) 7 g/L
2.高温高压灭菌后, 戴上手套取出培养基, 摇动容器使琼脂或琼脂糖充分混匀(此 时培养基温度很高,小心烫伤)。
3.待培养基冷却至 50~60℃时,加入热不稳定物质(如抗生素等),摇动容器充分 混匀。
4.铺制平板(30~35 ml 培养基/90 mm 培养皿)。

LB/Amp/X-Gal/LPTG 平板培养基
组份浓度 1%(W/V)Tryptone; 0.5%(W/V) Yeast Extract;1%(W/V)   NaCl;0.1 mg/ml Ampicillin ;0.024mg/ml IPTG;0.04 mg/ml X-GaL; 1.5%(W/V) Agar
配制量  l L
配制方法
1. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。 
Tryptone 10 g ; Yeast Extract 5g ;NaCl 10 g
2.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加 5 N NaOH(约 0.2 mL),调节 pH 值至 7.0。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L 后,加入 15 g Agar。
5.高温高压灭菌后,冷却至 60℃左右。
6.加入 1 ml Ampicillin(100 mg/ml)、1 ml IPTG(24 mg/ml)、2 ml X-Gal(20 mg/mL) 后均匀混合。
7.铺制平板(30~35 ml 培养基/90 mm 培养皿)。
8.4℃避光保存。

TB/Amp/X-Gal/LPTG 平板培养基
组份浓度 1.2%(W/V) Tryptone ;2.4%(W/V) Yeast Extract;0.4%(V/V) Glycerol;17 mM KH2PO4;72 mM K2HPO4;0.1 mg/ml Ampicillin ;0.024 mg/ml  IPTG ;0.04mg/mL X-GaL;1.5%(W/V) Agar
配制量  1L 
配制方法
1. 配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。  
溶解 2.31 g KH2PO4 和 12.54 g K2HPO4 于 90 ml 的去离子水中,搅拌溶解后,加 去离子水定容至 100 ml,高温高压灭菌。
2. 称取下列试剂,置于 l L 烧杯中。 Tryptone 12 g ;Yeast Extract 24 g;Glycerol 4 ml
3.加入约 800 ml 的去离子水,充分搅拌溶解。
4.加去离子水将培养基定容至 1 L 后。加入 l 5 g Agar。
5.高温高压灭菌后,冷却至 60℃左右。
6.加入 100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液、 l ml Ampicillin (100mg/ml)、1 ml IPTG(24mg/mL)、2 ml X-Gal(20 mg/ml)后均匀混合。
7.铺制平板(30~35 ml 培养基/90 mm 培养皿)。
8.4℃避光保存。

 

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