将PCR产物快速、定向、有效的克隆到任何目标载体而设计,有效避免了在克隆过程中遇到的合适内切酶的选择、磷酸化、补平、加A、使用中间载体的复杂步骤。无须连接酶,只需要把目标载体线性化(平末端,黏性末端都可以) ,PCR产物无须任何酶促处理,直接和目标载体混合,20-30分钟一站是解决问题
原理:
根据酶切后线性化载体的两端序列,分别在目的基因两端设计15base与载体末端同源的序列,PCR扩增产物二端就会分别带有15bp和线性化载体两端相同序列,PCR产物和线性化载体与同源重组酶充分混匀,22度C温浴30分钟后,按传统方法转化大肠杆菌就可以高效、定向将PCR产物克隆到目标载体上。
无需蓝白班筛选
无需担心克隆方向
无须担心阳性克隆比率
随意挑取克隆阳性率>99%
PCR产物快速、定向、有效的克隆到任何目标载体